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基于LCMS靶向代谢组学方法开发以及方法学验证

 
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方法学验证

方法学验证是对测定方法的评价,是建立新方法的研究内容和依据;主要给大家介绍4点:灵敏度、精密度、准确度、线性

灵敏度


灵敏度:包括检出限和定量限


01.检出限(The Limit of Detection,LOD):指检测方法在规定的实验条件下能检出分析物的最低浓度(信噪比s/n≥3);

02.定量限(The Limit of Quantitation,LOQ):指检测方法在规定的实验条件下能定量分析物的最低浓度(信噪比s/n≥10);

准确度


准确度:实际值与计量值之间的偏差,可以用加标回收率表示。


01.准确度=(测量值/真实值)×100%;

02.加标浓(4个加标浓度水平):定量下限加标,低浓度加标,中浓度加标,高浓度加标,每一浓度5个测试样;

03.要求准确度偏差在±15%以内,定量下限在±20%内;

精密度


精密度是指同一均匀样品在相同条件,N次重复测定结果彼此符合的程度。它们越接近就越精密,常用RSD表示精密度。

精密度:考察仪器方法和稳定性和重现性,包括日内精密度和日间精密度。

线性

线性:在外标法绘制标准曲线时需要考察线性相关性。


01.线性相关系数大于0.995。

02.通常校正标样需要5-7个有效点,且准确度需要满足80%-120%。


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